林业科学研究

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滇东南濒危植物长梗杜鹃的花粉形态及其特性研究

李太强, 刘雄芳, 李正红, 万友名, 刘秀贤, 张序, 安静, 马宏

2018, 31(3): 51-59. doi: 10.13275/j.cnki.lykxyj.2018.03.008

关键词: 长梗杜鹃, 花粉形态, 花粉活力, 固体培养基, 贮藏温度

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目的对滇东南特有濒危植物长梗杜鹃花粉形态及其特性进行系统研究，为长梗杜鹃进一步的遗传育种、花粉种质保存和传粉生物学等相关保护利用提供一些科学依据，并为系统分类研究作旁证。方法利用光学显微镜和扫描电子显微镜对长梗杜鹃花朵不同发育时期（花蕾膨大期、花瓣初开期和花瓣盛开期）的花粉形态进行了观察；通过TTC染色法对开花当天不同时段及开花后不同天数的花粉活力进行了快速检测；做L₂₅（5³）正交试验探讨10 g·L^-1琼脂和不同浓度的蔗糖、H₃BO₃、CaCl₂组成的培养基配方对长梗杜鹃花粉萌发的影响。同时，研究了其花粉在不同贮藏温度下活力随贮藏时间的变化情况。结果表明：从花蕾膨大期到花瓣盛开期，花粉逐渐成熟，为四合体花粉，呈正四面体排列，四合体直径为43.0 65.4 μm，平均51.3 μm；单粒花粉近球形且表面有粘丝，具三孔沟。在扫描电镜下，花粉粒外壁为均匀的颗粒状，孔沟周围颗粒细密呈波状突起；在光镜下，花粉粒外壁为内外2层，厚度约相等为0.8 1.2 μm。长梗杜鹃整个单花花期花粉活力较强，于开花当天9：00达最高，为92.18%，至花末期（花后第9天）仍保持着48.5%的活力，适宜做父本开展相关杂交育种工作。长梗杜鹃开花当天9：00的花粉在10 g·L^-1琼脂+100 g·L^-1蔗糖+200 mg·L^-1 H₃BO₃+ 0 mg·L^-1 CaCl₂的培养基中萌发率最高，达90.26%；极差分析表明，影响长梗杜鹃花粉萌发率高低的主次顺序为蔗糖→CaCl₂→H₃BO₃，一定浓度的蔗糖和H₃BO₃均起到了很好的促萌效果，而CaCl₂的添加则显著抑制了其花粉萌发。此外，适宜的低温有利于长梗杜鹃花粉的贮藏，-18℃条件下贮藏48 d仍有一定的萌发力。结论长梗杜鹃特殊的花粉外壁纹饰支持了前人对其系统位置划分的合理性。其较高的花粉活力、适宜的固体萌发培养基及贮藏温度的研究为今后以长梗杜鹃为父本的杂交育种提供了可靠的理论依据，对其他同属植物花粉形态及特性研究具有重要的指导意义。

云南干热河谷地区余甘子转录组分析

刘雄芳, 李太强, 李正红, 万友名, 刘秀贤, 张序, 安静, 马宏

2018, 31(5): 1-8. doi: 10.13275/j.cnki.lykxyj.2018.05.001

关键词: 余甘子, 转录组, Unigene, 功能注释, 编码序列, 转录因子, 抗性基因

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馥郁滇丁香LgFKF1基因的克隆及节律表达分析

万友名, 马宏, 刘雄芳, 张序, 安静, 刘秀贤, 李正红

2020, 33(1): 99-106. doi: 10.13275/j.cnki.lykxyj.2020.01.013

关键词: 馥郁滇丁香, LgFKF1基因, 克隆, 节律表达

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目的研究馥郁滇丁香LgFKF1基因的结构特点及其在特异组织中的节律表达特征，探索其在成花调控过程中的作用。方法采用RACE技术克隆获得馥郁滇丁香LgFKF1基因的cDNA全长序列,利用生物信息学方法对获得的基因核苷酸序列及编码蛋白质序列进行分析,利用qRT-PCR技术对特异组织的节律表达模式进行分析。结果序列分析表明：LgFKF1基因cDNA全长为2 271 bp，开放阅读框为1 917 bp，编码一个638个氨基酸的蛋白质；推导的氨基酸序列与扁果树、软枝黄蝉、纳塔尔倒吊笔、马利筋的FKF1蛋白具有较高同源性，达92.59%；预测LgFKF1蛋白属于不稳定的亲水性蛋白，定位在细胞核，无信号肽和跨膜区；结构主要由无规则卷曲结构、α螺旋结构、扩展长链和β-转角构成；遗传进化关系与扁果树最亲近。qRT-PCR分析表明：LgFKF1在诱导光周期下处理7 d时较非诱导光周期下的表达量高，而诱导光周期下处理10 d后其表达量则低于非诱导光周期的表达。一天中，LgFKF1在各组织中均有表达，且以叶片中的相对表达量较高。LgFKF1因组织不同在不同的时间呈现出单峰和双峰表达，其中，根、芽及花蕾中均在夜间23:00出现单峰表达；茎、叶及开放的花朵中在不同时间出现双峰表达，茎在晚上20:00和凌晨5:00，叶在凌晨2:00和早上8:00，开放花朵在夜间23:00和凌晨5:00。结论从馥郁滇丁香中克隆获得了LgFKF1基因，其编码的蛋白序列与其它植物的FKF1具有较高的同源性。LgFKF1基因的表达受光周期影响，在诱导光周期下，不同的组织呈现出不同的表达模式，其中，仅叶片中的1个表达峰值出现在白昼，其余组织中的表达峰值均出现在夜间。在各组织中，叶片中的表达量较高。LgFKF1基因的特异组织节律表达有助于为其生物学功能的进一步研究提供参考依据。

地涌金莲MlCYP734A6基因的克隆与表达分析

安静, 万友名, 马宏, 刘雄芳, 张秀姣, 曹毓蓉, 李正红

2021, 34(3): 37-45. doi: 10.13275/j.cnki.lykxyj.2021.03.004

关键词: 地涌金莲, CYP734A6, 油菜素内酯, 基因克隆, 表达分析

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滇东南濒危植物长梗杜鹃转录组微卫星特征分析

李太强, 刘雄芳, 万友名, 李正红, 李钰莹, 刘秀贤, 马宏

2017, 30(4): 533-541. doi: 10.13275/j.cnki.lykxyj.2017.04.001

关键词: 长梗杜鹃, 转录组, 微卫星特征, 潜在多态性

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馥郁滇丁香‘香妃’成花过程的主要内源物质变化特点

万友名, 马宏, 刘雄芳, 张序, 安静, 刘秀贤, 李正红

2019, 32(6): 144-150. doi: 10.13275/j.cnki.lykxyj.2019.06.019

关键词: 馥郁滇丁香, 成花过程, 内源物质

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